Son zamanlarda, DNA fragmantasyon testleri laboratuvar uygulamasina yaygin bir sekilde dahil edilmistir. Erkek gametlerin dollenme sureclerine, embriyo kalitesine ve erken gebelik evrelerinde bile embriyo gelisimine buyuk katkisi oldugundan, DNA butunlugu ve sperm kalitsal bilgileri yavrular icin cok onemlidir. Sperm, erken embriyo gelisimi doneminde aktif olan proteinler icin kodlanmis yaklasIk 3000 farkli turde mRNA icerir. Ayrica henuz bilinmeyen ve oositte esdegeri olmayan baskalari da vardir.
Sperm Secimi
ICSInin rutin prosedur olarak kullanilmaya baslanmasindan bu yana, tek bir sperm hucresinin enjekte edilmesi gerektiginden, sperm konsantrasyonu ve hareketliligi artik cok onemli olmadigindan, standart semen analizinin onemi ihmal edilmistir. Bir Hoffman modulasyon kontrast mikroskobu altinda standart ICSI proseduru veya buyutme × 400de Nomarski optigi yapildiginda, sperm basinin (boyut ve sekil) orta parcasi ve kuyrugunun gorsellestirilmesi ve degerlendirilmesi mumkundur, ancak ayrintili ultrastrukturel morfoloji incelemesi sinirlidir.
Geleneksel ICSI uygulandiginda, morfolojik olarak normal spermi ayrintili yapisal portresine dayanarak degerlendirmek ve secmek zor olacaktir. Vakuolizasyon, membran invajinasyonlari, orta parca kalinligi veya deformite, vb. Sperm basindaki yuksek vakuolizasyonun iliskili olup olmadigi tartismalidir daha yuksek DNA fragmantasyonu ve anoploidi orani ile embriyo kalitesi ve implantasyon sonrasi gelisim uzerinde olumsuz etkilere ve erken gebelik evrelerinde daha yuksek gebelik kaybi sIkligina sahip olabilir. Yine de, bazi ciftler icin ayrintili sperm incelemesi oncesinde ICSI tercih edilir.
Intrasitoplazmik morfolojik olarak secilmis sperm enjeksiyonu (IMSI), sperm morfolojisi degerlendirmesinin temel tasidir. Hareketli sperm organel morfolojisinin (MSOME) incelenmesine dayanan IMSI, intrasitoplazmik enjeksiyon icin hareketli ve morfolojik olarak normal spermlerin seciminde kullanilan tek gercek zamanli, boyanmamis yontemdir. IMSI ilk olarak Baratoov ve digerleri tarafindan tanitilmistir. MSOME secimi, Diferansiyel parazit kontrastli ters isIk yayan mikroskop veya Nomarski diferansiyel parazit kontrast optikleri ve x 6600 ila × 13.000 arasinda degisen yuksek buyutme oranlarinda dijital kamera altinda yapilir. MSOME kriterleri kullanilarak hareketli sperm fraksiyonu ve her bir hucre malformasyonu, akrozom, akrozom sonrasi lamina, boyun, mitokondri, kuyruk ve cekirdekten olusan alti organelin morfolojik durumuna gore degerlendirilir. Incelenen orneklerdeki spermatozoanin sadece % 33u bu kriterlere gore morfolojik olarak normal gorunmektedir.
Her alan icin tanimlanan kusurlar sunlardir:
Akrozomal alan eksIk, kismi veya vezikule;
Post-akrozomal lamina yok veya vezikule;
Boyun abaksiyal, sitoplazmik damlacik.
Mitokondri eksIklik, kismi, duzensizlik;
Kuyruk eksIk, kivrimli, kirik, cok, kisa;
Cekirdek kucuk veya buyuk oval, dar, genis veya kisa, bolgesel bozukluk, vakuoller nukleer alanin% 4unden fazlasini kaplar. Bununla birlikte, hareketli spermlerin degerlendirilmesi cesitli bilim adamlari tarafindan farkli sekillerde belirlenebilir.
Sperm Sayisinin Genetik ile IliskisiYuksek buyutme altinda hareketli spermatozoanin gercek zamanli olarak gozlemlenmesinde en onemli olan sey, sperm hucresinin basindaki sayi, boyut ve lokasyondaki vakuollerin varliginin degerlendirilmesidir. Vakuollerin kesin kaynagi hala bilinmemektedir, ancak farkli hipotezler bunlarin sperm olgunlasmasi sirasinda spermatogenezin erken asamalarindan kaynaklandigini ve vakuol alani nedeniyle sayilarinin arttigini ileri surmektedir. Diger calismalar, spermatozoada vakuol olusumunun inkubasyon ve ejakulasyondan sonraki kapasititasyon doneminde basladigini dusundurmektedir.
Bununla birlikte, yuksek vakuolizasyon veya sperm basindaki buyuk vakuollerin varligi, artmis DNA fragmantasyon oranlari ve artmis kromatin olgunlasmamislik seviyesi ile iliskili olabilir ve fertilizasyon ve gebelik oranlarini etkileyebilir. Sperm morfolojisi degerlendirmesi, sperm secimi icin kesin bir oran sistemi olarak Cassuto ve Barak Skoruna dayanabilir. Skorun olusturulmasi icin spermatozoonun alti parametresi dikkate alindi: kafa, akrozom, vakuol, baz, yerlestirme ve sitoplazmik damlacik (HAVBIC). Bas, vakuol ve baz anormallikler icin ana kriterler olarak kabul edildi ve akrozom, yerlestirme ve sitoplazmik damlacik sperm degerlendirmesi icin kucuk kriterlerdir. Asagidaki denklem gelistirildi:
S c o r e o f s p e r m a t o z o a = ( 2 × H e a d ) + ( 3 × V a c u o l e ) + ( 1 × B a s e ) Spermatozoa puani=2×Kafa+3×Koful+1×Baz E1
Formule bagli olarak, sperm hucreleri skoru 0 ile 6 arasinda degisebilir ve kaliteye gore uc grup ayirt edilmistir:
Sinif 1 Yuksek kaliteli spermatozoa (skor 46)
Sinif 2 Orta kalitede spermatozoa (skor 13)
Sinif 3 Dusuk kaliteli spermatozoa (skor 0)Sperm Sayisinin Genetik ile Iliskisi
IMSI kullanarak gebelik oranlarinda ICSI ile karsilastirildiginda artis gosteren ilk makalelere dayanarak], tanitilmasindan bu yana yontem, zaman alici bir teknik olmasina ragmen, laboratuvar uygulamasina yaygin bir sekilde dahil edilmistir.
Yuksek buyutme altinda hareketli spermatozoanin degerlendirilmesi, yuksek duzeyde DNA fragmantasyonu sperm anoploidi, siddetli oligo- veya oligoastenozoospermi ve / veya teratozoospermi, tekrarlayan implantasyon basarisizliklari veya tekrarlayan erken dusukler oykusu, ileri kadin yasi ve ileri erkek yasi olan hastalar icin uygundur. Sonraki calismalar, erkek faktor kisirligi olan hastalarda daha iyi sonuclar elde etmek icin sperm morfolojisini degerlendiren yeni yontemin onemi hakkinda daha fazla analiz ve bilgi saglamistir.
IMSI prosedurunun in vitro dongu sonuclari uzerindeki etkisi konusunda hala tartismali calisma sonuclari vardir. Bununla birlikte, uygulamasina fayda saglayacak gorunen sey, sperm morfolojisi ve islevinin daha iyi anlasilmasidir.
Genetik ve Sperm Sayisi
Y-kromozomu delesyonu azospermi, oligozoospermi (dusuk sperm sayisi) veya anormal sperm morfolojisi ve motilitesi ile iliskilidir. AZFa ve AZFb delesyonlari saptandiginda, testikuler sperm elde etme etkisiz olacaktir, ancak AZFc delesyonu olan cogu erkek icin basarili bir secenektir. Dogal gebe kalma ve Y-mikrodelesyon gecisini bildiren bir vaka vardir. Teshis konuldugunda ve Y kromozomu kisirliginin Yye bagli bir sekilde miras kaldigi dusunuldugunde, hastalar genetik uzmanlariyla spesifik genetik durumu tartismali ve bu durum gelecek nesillerde kisirliga yol acabilir.
TESE secenegini elde etmek icin arastirilabilecek diger bir gen, Testis eksprese edilen gen 11dir (TEX 11). Calismalar, TEX11in (Xe bagli mayoza ozgu gen) azoospermik erkeklerde mutasyona ugradigini gostermektedir. Sperm elde etme bu hastalar icin gecerli degildir. Konjenital bilateral vas deferens (CBAVD) yoklugu ve ejakulatta sperm hucrelerinin olmamasi, mikrocerrahi TESE veya PESA ve ardindan ICSI kullanilarak super hale getirilebilir. CBAVD, kistik fibroz transmembran iletkenlik duzenleyici (CFTR) genindeki mutasyonlarla iliskili oldugundan , durumu arastiran ve genetik testler ve prosedurlerden once konsultasyon saglanmalidir cunku ciftin cocuk sahibi olma riski vardir. (kistik fibroz)
Sonuc olarak, dogurganlik tedavisinin bir parcasi olarak genetik danismanligin yani sira prenatal genetik tani (PGT) veya preimplantasyon genetik tarama (PGS) onerilmelidir.
ALİNTİ ~
Sperm Secimi
ICSInin rutin prosedur olarak kullanilmaya baslanmasindan bu yana, tek bir sperm hucresinin enjekte edilmesi gerektiginden, sperm konsantrasyonu ve hareketliligi artik cok onemli olmadigindan, standart semen analizinin onemi ihmal edilmistir. Bir Hoffman modulasyon kontrast mikroskobu altinda standart ICSI proseduru veya buyutme × 400de Nomarski optigi yapildiginda, sperm basinin (boyut ve sekil) orta parcasi ve kuyrugunun gorsellestirilmesi ve degerlendirilmesi mumkundur, ancak ayrintili ultrastrukturel morfoloji incelemesi sinirlidir.
Geleneksel ICSI uygulandiginda, morfolojik olarak normal spermi ayrintili yapisal portresine dayanarak degerlendirmek ve secmek zor olacaktir. Vakuolizasyon, membran invajinasyonlari, orta parca kalinligi veya deformite, vb. Sperm basindaki yuksek vakuolizasyonun iliskili olup olmadigi tartismalidir daha yuksek DNA fragmantasyonu ve anoploidi orani ile embriyo kalitesi ve implantasyon sonrasi gelisim uzerinde olumsuz etkilere ve erken gebelik evrelerinde daha yuksek gebelik kaybi sIkligina sahip olabilir. Yine de, bazi ciftler icin ayrintili sperm incelemesi oncesinde ICSI tercih edilir.
Intrasitoplazmik morfolojik olarak secilmis sperm enjeksiyonu (IMSI), sperm morfolojisi degerlendirmesinin temel tasidir. Hareketli sperm organel morfolojisinin (MSOME) incelenmesine dayanan IMSI, intrasitoplazmik enjeksiyon icin hareketli ve morfolojik olarak normal spermlerin seciminde kullanilan tek gercek zamanli, boyanmamis yontemdir. IMSI ilk olarak Baratoov ve digerleri tarafindan tanitilmistir. MSOME secimi, Diferansiyel parazit kontrastli ters isIk yayan mikroskop veya Nomarski diferansiyel parazit kontrast optikleri ve x 6600 ila × 13.000 arasinda degisen yuksek buyutme oranlarinda dijital kamera altinda yapilir. MSOME kriterleri kullanilarak hareketli sperm fraksiyonu ve her bir hucre malformasyonu, akrozom, akrozom sonrasi lamina, boyun, mitokondri, kuyruk ve cekirdekten olusan alti organelin morfolojik durumuna gore degerlendirilir. Incelenen orneklerdeki spermatozoanin sadece % 33u bu kriterlere gore morfolojik olarak normal gorunmektedir.
Her alan icin tanimlanan kusurlar sunlardir:
Akrozomal alan eksIk, kismi veya vezikule;
Post-akrozomal lamina yok veya vezikule;
Boyun abaksiyal, sitoplazmik damlacik.
Mitokondri eksIklik, kismi, duzensizlik;
Kuyruk eksIk, kivrimli, kirik, cok, kisa;
Cekirdek kucuk veya buyuk oval, dar, genis veya kisa, bolgesel bozukluk, vakuoller nukleer alanin% 4unden fazlasini kaplar. Bununla birlikte, hareketli spermlerin degerlendirilmesi cesitli bilim adamlari tarafindan farkli sekillerde belirlenebilir.
Sperm Sayisinin Genetik ile IliskisiYuksek buyutme altinda hareketli spermatozoanin gercek zamanli olarak gozlemlenmesinde en onemli olan sey, sperm hucresinin basindaki sayi, boyut ve lokasyondaki vakuollerin varliginin degerlendirilmesidir. Vakuollerin kesin kaynagi hala bilinmemektedir, ancak farkli hipotezler bunlarin sperm olgunlasmasi sirasinda spermatogenezin erken asamalarindan kaynaklandigini ve vakuol alani nedeniyle sayilarinin arttigini ileri surmektedir. Diger calismalar, spermatozoada vakuol olusumunun inkubasyon ve ejakulasyondan sonraki kapasititasyon doneminde basladigini dusundurmektedir.
Bununla birlikte, yuksek vakuolizasyon veya sperm basindaki buyuk vakuollerin varligi, artmis DNA fragmantasyon oranlari ve artmis kromatin olgunlasmamislik seviyesi ile iliskili olabilir ve fertilizasyon ve gebelik oranlarini etkileyebilir. Sperm morfolojisi degerlendirmesi, sperm secimi icin kesin bir oran sistemi olarak Cassuto ve Barak Skoruna dayanabilir. Skorun olusturulmasi icin spermatozoonun alti parametresi dikkate alindi: kafa, akrozom, vakuol, baz, yerlestirme ve sitoplazmik damlacik (HAVBIC). Bas, vakuol ve baz anormallikler icin ana kriterler olarak kabul edildi ve akrozom, yerlestirme ve sitoplazmik damlacik sperm degerlendirmesi icin kucuk kriterlerdir. Asagidaki denklem gelistirildi:
S c o r e o f s p e r m a t o z o a = ( 2 × H e a d ) + ( 3 × V a c u o l e ) + ( 1 × B a s e ) Spermatozoa puani=2×Kafa+3×Koful+1×Baz E1
Formule bagli olarak, sperm hucreleri skoru 0 ile 6 arasinda degisebilir ve kaliteye gore uc grup ayirt edilmistir:
Sinif 1 Yuksek kaliteli spermatozoa (skor 46)
Sinif 2 Orta kalitede spermatozoa (skor 13)
Sinif 3 Dusuk kaliteli spermatozoa (skor 0)Sperm Sayisinin Genetik ile Iliskisi
IMSI kullanarak gebelik oranlarinda ICSI ile karsilastirildiginda artis gosteren ilk makalelere dayanarak], tanitilmasindan bu yana yontem, zaman alici bir teknik olmasina ragmen, laboratuvar uygulamasina yaygin bir sekilde dahil edilmistir.
Yuksek buyutme altinda hareketli spermatozoanin degerlendirilmesi, yuksek duzeyde DNA fragmantasyonu sperm anoploidi, siddetli oligo- veya oligoastenozoospermi ve / veya teratozoospermi, tekrarlayan implantasyon basarisizliklari veya tekrarlayan erken dusukler oykusu, ileri kadin yasi ve ileri erkek yasi olan hastalar icin uygundur. Sonraki calismalar, erkek faktor kisirligi olan hastalarda daha iyi sonuclar elde etmek icin sperm morfolojisini degerlendiren yeni yontemin onemi hakkinda daha fazla analiz ve bilgi saglamistir.
IMSI prosedurunun in vitro dongu sonuclari uzerindeki etkisi konusunda hala tartismali calisma sonuclari vardir. Bununla birlikte, uygulamasina fayda saglayacak gorunen sey, sperm morfolojisi ve islevinin daha iyi anlasilmasidir.
Genetik ve Sperm Sayisi
Y-kromozomu delesyonu azospermi, oligozoospermi (dusuk sperm sayisi) veya anormal sperm morfolojisi ve motilitesi ile iliskilidir. AZFa ve AZFb delesyonlari saptandiginda, testikuler sperm elde etme etkisiz olacaktir, ancak AZFc delesyonu olan cogu erkek icin basarili bir secenektir. Dogal gebe kalma ve Y-mikrodelesyon gecisini bildiren bir vaka vardir. Teshis konuldugunda ve Y kromozomu kisirliginin Yye bagli bir sekilde miras kaldigi dusunuldugunde, hastalar genetik uzmanlariyla spesifik genetik durumu tartismali ve bu durum gelecek nesillerde kisirliga yol acabilir.
TESE secenegini elde etmek icin arastirilabilecek diger bir gen, Testis eksprese edilen gen 11dir (TEX 11). Calismalar, TEX11in (Xe bagli mayoza ozgu gen) azoospermik erkeklerde mutasyona ugradigini gostermektedir. Sperm elde etme bu hastalar icin gecerli degildir. Konjenital bilateral vas deferens (CBAVD) yoklugu ve ejakulatta sperm hucrelerinin olmamasi, mikrocerrahi TESE veya PESA ve ardindan ICSI kullanilarak super hale getirilebilir. CBAVD, kistik fibroz transmembran iletkenlik duzenleyici (CFTR) genindeki mutasyonlarla iliskili oldugundan , durumu arastiran ve genetik testler ve prosedurlerden once konsultasyon saglanmalidir cunku ciftin cocuk sahibi olma riski vardir. (kistik fibroz)
Sonuc olarak, dogurganlik tedavisinin bir parcasi olarak genetik danismanligin yani sira prenatal genetik tani (PGT) veya preimplantasyon genetik tarama (PGS) onerilmelidir.
ALİNTİ ~
